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Kit de marquage
Kit de marquage aminoallyl pour DNA microarrays

Description Produit


Ce kit a été optimisé pour utiliser 1 à 2 µg comme matériel de départ, et il peut générer 200 à 500 ng d’ADNc marqué. Ce kit supporte tous types de substrats et de chimies de surface de lames, et il fournit une incorporation efficace des marqueurs fluorescents. Le protocole est facile d’utilisation et le kit arrive prêt à l’emploi sans nécessités de préparation de tampons ou de colonnes. L’élimination des marqueurs en fin de protocole réduit le bruit de fond dans les hybridations de microarrays.
Ce kit peut être utilisé en combinaison avec le kit d’extraction d’ARN total ainsi qu’avec le kit d’amplification MiniAmp.

Référence Désignation
AFK Kit de marquage aminoallyl pour DNA microarrays (20 marquages)

Spécifications Techniques


Equipements nécessaires

• Marqueurs fluorescents tels que Amersham CyDye™ Set Cat # RPN5661, Alexa Fluor® 555 and Alexa Fluor® 647, Pierce DyLight 547 and 647 Fluors etc
• Ethanol 100%
• Ethanol 80%
• Glace pour les incubations
• Tubes PCR
• Thermocycler
• Microcentrifugeuse allant jusqu’à 10 000 rpm ou plus
• Micropipettes
• Vortex

Contenance du Kit

Articles Conditionnement Stockage
 Random Primer  22 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 dTVN Primer  22 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 Labeling Enzyme Mix  33 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 Labeling Reaction Buffer  44 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 AA-dNTP Mix  88 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 DTT  22 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 cDNA Synthesis Stop Solution  220 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 Denaturing Solution  220 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 Neutralization Solution  220 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 Dye Binding Buffer  500 µl in 2ml tube  -20°C Freezer
 Dye Binding Stop Solution  110 µl in 0.5ml tube  -20°C Freezer
 DNA Binding Buffer  6.6 ml in 8ml bottle  Room Temp
 DNA Wash Buffer Concentrate  1.5 ml in 8ml bottle  Room Temp
 DNA Micro Column  30  Room Temp
 Elution Tube (1.5ml)  30  Room Temp
 2 ml Wash Tube  30  Room Temp
 Nuclease Free Water  1.5ml in 2ml tube  -20°C Freezer

Protocole court

1. Réaliser la synthèse d’ADNc à partir de l’ARNm.
2. Réaliser l’hydrolyse de l’ARN
3. Purifier l’aminoallyl cDNA marqué.
4. Réaliser le couplage des marqueurs fluorescents avec l’aminoallyl cDNA marqué.
5. Purifier l’ADNc marqué avec les fluorophores.

Nous consulter pour plus d'information sur le protocole complet

Kit de marquage de protéines pour puces à protéines

Description Produit


Ce kit de marquage pour les protéines contient des marqueurs fluorescents, réactifs et colonnes de purification pour un marquage de hauts rendement et qualité dans les applications de puces à protéines. Le protocole est simple, flexible et facile d’utilisation, et peut être utilisé avec des anticorps, des IgG secondaires, des enzymes et autres protéines.
Les marqueurs aminés fournis avec ce kit constituent une excellente alternative aux marqueurs Cy3 et Cy5 utilisés avec les scanners classiques de microarrays. Leurs longueurs d’onde d’absorption et d’émission sont compatibles avec les filtres courant des scanners, sans nécessité de se procurer un nouveau jeu de filtres.
 
Référence Désignation
Nous contacter Kit de marquage fluorescent 2-couleurs pour protéïnes

Spécifications Techniques


Equipements nécessaires
• Microarrays Anticorps: Protein microarrays, PlasmaScan antibodies microarrays, Tissue microarrays etc.
• Instrumentations classique pour microarrays:  TrayMix hybridization stations, Ozone Free Box etc.
• Tubes de réactions
• Micropipettes
• Vortex
• Centrifugeuse

Contenance du Kit
Merci de nous contacter pour plus d’informations concernant le contenu de ce kit.

Protocole court pour 1 mg de protéine

1. Dissoudre 1 mg de proteines dans 100 µL de PBS dans un tube
2. Ajouter 20 µL de solution A au tube contenant la protéine.
3. Preparer les marqueurs fluorescents extemporanément.
Ajouter 25 µL de solution B à un tube de marqueur. Mélanger par pipettage pour dissoudre le contenu.
4. Ajouter 10 µL de la solution du marqueur au tube contenant la protéine. Mélanger doucement avec un vortex
Il est conseillé de stocker la solution marqueur à 4°C, elle peut être utilisée une nouvelle fois au cours de la semaine suivante.
5. Incuber 1 h à température ambiante à l’abri de la lumière.
6. Pendant l’incubation, préparer 2 colonnes de purification.
7. Arrêter la réaction de marquage en ajoutant le tampon D (30 minutes).
8. Purifier la reaction en transférant la moitié de la réaction dans les 2 colonnes de purification. Centrifuger à 750 g pendant 2 min. Collecter la protéine marquée.